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2010年高考生物知识点:DNA的粗提取和鉴定

  发布时间:2009/12/6


  

 

DNA的粗提取和鉴定

高考生物知识点:DNA的粗提取和鉴定

一、书本知识整理
 1.实验目的
 2.目的要求
 3.方法步骤
二、思维拓展
 1.用猪的血液代替鸡血不行的原理是:哺乳动物成熟的细胞中无细胞核
 2.实验成功的关键:能否提取到较纯净的DNA丝状物
 3.实验的注意事项:
 ①实验中共有三次过滤。第1、3次要用其滤液,使用纱布为1~2层,第二次要用其滤出的黏稠物,使用的纱布为多层。
 ②实验中有6次搅拌。除最后一次搅拌外,前5次搅拌均朝一个方向,且第一次快速搅拌,其余各步搅拌都要不停地轻轻搅拌,玻璃棒插入位置不同,进行第2、3、5次时,玻璃棒不要直插杯底,进行步骤7时,玻璃棒插入烧杯溶液的中间。
 ③实验中两次使用蒸馏水。步骤1中加入蒸馏水是为了得到浓度低于血细胞内部浓度的溶液,使血细胞吸水膨胀破裂,要充分搅拌不应少于5min。步骤3中加入蒸馏水是为了使氯化钠的物质的量浓度达到DNA溶解度的最低点0.14mol/L,即稀释氯化钠溶液。
 ④实验中三次加入氯化钠溶液。在步骤2、5中加入的质量浓度为2mol/L,在步骤8中加入的质量浓度为0.015mol/L,目的一样都是为了DNA的溶解。
 ⑤用冷酒精浓缩和沉淀DNA时所用的95%酒精,必须经过充分预冷后才能使用,冷酒精与含DNA的氯化钠溶液体积比是2:1。如果用冷酒精处理后,悬浮于溶液中的丝状物较少,可将混合液放于冰箱中再冷却几分钟,然后再用玻璃棒卷起丝状物。
 ⑥盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑料制的。由于玻璃表面带电荷,DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面,故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。





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